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N-糖基化修饰组
N-糖基化(N-Glycosylation)是最重要的蛋白质翻译后修饰之一,主要在复杂的多细胞或组织形成过程中起关键作用,参与细胞与细胞的连接、受体配体的相互作用、免疫应答、细胞凋亡及各种发病机理等生物学过程。拜谱生物N-糖基化蛋白质修饰组,利用凝集素富集N-糖基化肽段,高通量,高分辨,可分析不同实验条件下糖基化蛋白质组变化及信号通路,以及候选糖蛋白标志物的筛选等。
N-糖基化修饰组
原理/实验流程
糖份子企业的缜密性和多数N-glycoproteins低表明水平方向令对N-glycosylation格局的分析步骤的说明颇为的困难。在检查低丰度的N糖基化表达核血清质或肽段时,但其中夹杂着许多未表达的核血清质肽断,这很很简单将低丰度的糖基化表达核血清质肽段的卫星信号掩盖了一些。凝素亲和法是目前为止糖核血清质质组学中应用范围广泛的离心分离丰度步骤。凝集素(lectin)是一种类糖整合核血清质质,能重感情掌握某一些唯一性格局的单糖或聚糖中对应的糖基字段而与之整合,它是与糖链不可逆转非共价整合,糖核血清质或糖肽被凝集素获取此后,平常用对应的单糖利用市场竞争整合凝集素将糖核血清质或糖肽过柱成功。 球蛋清历经酶解后合理实行凝集素(lectin)丰度N-糖基化肽段,但是用N-糖酰胺酶(PNGase)在H218O中做手术拼接在天冬酰胺残基(Asn)上的糖链。该净化处理可能会导致Asn碳原子式量增多2.9890Da。最后一步用高误差LC-MS质谱仪探测脱糖后的肽段,依据文献检索数据文件库,根本脱糖后碳原子式量和其实际碳原子式量的发生改变以其糖基化淡化肽段的队列,为了判定该球蛋清的N-糖基化位点。N-糖基化位点判定后来,再合理实行label-free的方式对其实行酶联免疫法了解。

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产品特色
  • 01大规模的蛋白质组N-糖基化位点的鉴定与分析

  • 02采用凝集素特异性富集N-糖基化肽段
  • 03高通量,高分辨

应用方向
  • 01
    不同实验条件下糖基化蛋白质组变化及信号通路分析

  • 02
    筛选候选糖蛋白标志物


送样建议
样本类型 常规送样量
植物叶片 湿重≥3g
植物根茎、木质部、韧皮部等 湿重≥5g
细胞样品 细胞量湿重≥5*10^7
组织样品 人、动物、微生物湿重≥50mg
体液样品 血清、血浆体积≥200μl,脑脊液≥500μl,尿液≥1000μl
参考文献
1、Zielinska DF, Gnad F, Schropp K, Wi?niewski JR, Mann M. Mapping N-glycosylation sites across seven evolutionarily distant species reveals a divergent substrate proteome despite a common core machinery. Mol Cell. 2012;46(4):542-548. doi:10.1016/j.molcel.2012.04.031
涉及的产品
蛋白鉴定,蛋白质组,多肽组学,靶向蛋白质,修饰蛋白质组,代谢组,非靶代谢,靶向代谢,医学全靶代谢,植物广靶代谢,测序,转录组,基因组,微生物组,ncRNA,IP-seq,生信分析
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